应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切过DNA片段放了一周还能连接吗
191/2返回列表12下一页
查看: 2355  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ygyly

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切过DNA片段放了一周还能连接吗

我用HindIII 和NcoI 双酶切的DNA片段和Duet载体，由于一开始感受态没做好，就在-18℃放置了一周，现在还能连接吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-11 17:52:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-11 21:33:18
-20℃保藏的话应该没问题的，可以进行连接的~
赞一下 回复此楼
聪明才智要为意外做准备~~
2楼2012-07-11 19:59:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunlong0377

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-11 21:33:21
能连接，可以把酶切产物量加大，相对浓度提高，做连接时候。
赞一下 回复此楼
NCS
3楼2012-07-11 20:11:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chunlong0377 at 2012-07-11 20:11:13
能连接，可以把酶切产物量加大，相对浓度提高，做连接时候。

谢谢！浓度提高是指扩大目的基因和载体的比值吗还是比值不变，同时提高两者在体系中的浓度？
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-12 09:08:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2012-07-11 19:59:02
-20℃保藏的话应该没问题的，可以进行连接的~

谢谢！向已经酶切过的片段，最多能放置多长时间？
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-12 09:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunlong0377

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by ygyly at 2012-07-12 09:08:46
谢谢！浓度提高是指扩大目的基因和载体的比值吗还是比值不变，同时提高两者在体系中的浓度？...

扩大目的基因和载体的比值。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ygyly
NCS
6楼2012-07-12 09:16:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by chunlong0377 at 2012-07-12 09:16:47
扩大目的基因和载体的比值。...

谢谢！
回复此楼
7楼2012-07-12 10:06:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
肯定可以用，我之前酶切的片段因为出差做中试，所以在4度放了将近20天，回来照样ok。你的还放在-18，那应该是没有问题的。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ygyly
8楼2012-07-12 10:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2012-07-12 10:15:49
肯定可以用，我之前酶切的片段因为出差做中试，所以在4度放了将近20天，回来照样ok。你的还放在-18，那应该是没有问题的。

谢谢！我明天试试！
回复此楼
9楼2012-07-12 12:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ranger04

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用TE buffer溶解的酶切产物可以在-20C存放6个月没问题。我曾经用过几个半年前切好的载体，一切正常。仅供参考
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ygyly
10楼2012-07-12 13:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ygyly 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭