应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问qPCR时，目的基因与内参的CT值之差大于10，是不是说明表达非常低？？
71/1返回列表
查看: 15414  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

necrosis

新虫 (小有名气)

[求助] 请问qPCR时，目的基因与内参的CT值之差大于10，是不是说明表达非常低？？ 已有3人参与

我是qPCR新手，想请教大家两个问题，大家互相探讨。
1、我之前做过一个基因的普通PCR，跑胶结果显示样本A没有条带，B有明显的带，内参18S是齐的。然后同样的样本做了qPCR，发现样本A与18s的CT值之差为10左右，而样本B为2。我的问题是，目的基因与内参的CT 值之差大于10，是否说明目的基因表达量很低甚至不表达？这可以作为一个标准吗？如果不是这样，是否就只能与阴性对照（即不加cDNA模板）进行对比来判断基因是否不表达？
2、如果要用qPCR检测某个基因是否被敲除掉，可以用上面提到的方法吗？（与内参的CT值比较，或者与阴性对照CT值比较）
谢谢大家了！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-02-13 13:21:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

necrosis

新虫 (小有名气)
谢谢你，不知道还有没有人关注过△CT值与表达的关系
赞一下 回复此楼
2楼2015-02-13 13:45:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
necrosis(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:56:48
引用回帖:
2楼: Originally posted by necrosis at 2015-02-13 13:45:28
谢谢你，不知道还有没有人关注过△CT值与表达的关系

你别吓我。。。你在谢谁呢。。
1、可以作为一个标准。阴性对照是用来检测你本次试验有没污染。
2、看基因有没被敲除，你直接用这个基因的探针来钓。P不出来就是没啊。。
赞一下 回复此楼
3楼2015-02-13 15:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

necrosis

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bbqlhb at 2015-02-13 15:21:00
你别吓我。。。你在谢谁呢。。
1、可以作为一个标准。阴性对照是用来检测你本次试验有没污染。
2、看基因有没被敲除，你直接用这个基因的探针来钓。P不出来就是没啊。。...

追问一下：你说的“P不出来”有没有判断标准呢？如果是半定量应该就是没有条带，那如果用qPCR怎么判断呢？
赞一下 回复此楼
4楼2015-02-13 22:23:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
内参都是浓度相对很高的RNA，差10个Ct还可以接受
Ct在30以下一般都没问题，如果含量太低可以适当提高模板浓度弥补下
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2015-02-14 06:42:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夜舞龙

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只能说明表达量比内参低,只要在规定范围内有值就应该有表达,具体多低要看内参本身情况,非要精确可进行绝对定量

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-02-15 12:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夜舞龙

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

看基因是否敲除得看具体情况,什么技术敲除的,引物设计在哪,最好设计时就弄成如果敲除就彻底P不出

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-02-15 12:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 necrosis 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 听说今天filecode变了 +16 布布和一二 2026-08-06 30/1500 2026-08-06 21:37 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +10 等待解的谜 2026-08-06 14/700 2026-08-06 21:16 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +3 archvillain 2026-08-06 7/350 2026-08-06 21:05 by archvillain
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[基金申请] 基金中了 +4 laoda193707 2026-08-06 4/200 2026-08-06 18:56 by olivermiaoer
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭