| 查看: 2848 | 回复: 10 | |||
shiliyusly新虫 (小有名气)
|
[求助]
QPCR之引物设计(二)
|
||
|
大家好，我做QPCR扩增效率的时候遇到一个基因，之前测得的CT值是30左右，退火温度是54度，溶解曲线如图1。 我现在补做扩增效率，体系试剂什么都是一样的，可是测得的相同样品的CT值基本都在33左右我试过51-57度退火温度，扩增效率很低，连拟合度都不好，CT值比较低，我用的是2倍稀释度，怕是稀释不准，后来重复了几次，但结果依然不是很好。溶解曲线如图2。 大家看这是什么原因呢，感觉引物质量是还好吧？是要换引物吗？  图2.jpg  图1.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 |
» 本帖@通知
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有144人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- QPCR 溶解曲线
已经有9人回复
- 如何利用基因组DNA进行real time PCR ？？？？
已经有4人回复
- qPCR空白有荧光信号，无法去除
已经有7人回复
- 关于荧光定量的问题
已经有8人回复
- 求助 real-time PCR 曲线弯折 问题
已经有7人回复
- 荧光定量熔解温度
已经有16人回复
- PCR出现非特异性扩增，求高手解答
已经有9人回复
- Q-PCR的CT值是在30之前可靠么？
已经有6人回复
- 有做过荧光定量PCR的吗？
已经有9人回复
- 大家做RT-qPCR设计引物用的什么软件呀？
已经有15人回复
- 关于qPCR的几个问题，求解答
已经有3人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导
已经有5人回复
- 【求助/交流】为什么PCR扩增产物片段长度比设计时的要长很多？
已经有10人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（二）
已经有12人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
8楼2013-03-09 01:16:52
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-03-07 09:48:56
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
3楼2013-03-07 09:51:33
shiliyusly
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 265.4
- 散金: 17
- 红花: 1
- 帖子: 138
- 在线: 71.5小时
- 虫号: 1434769
- 注册: 2011-10-10
- 专业: 食品科学基础
4楼2013-03-07 13:13:24
shiliyusly
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 265.4
- 散金: 17
- 红花: 1
- 帖子: 138
- 在线: 71.5小时
- 虫号: 1434769
- 注册: 2011-10-10
- 专业: 食品科学基础
5楼2013-03-07 13:14:56
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
6楼2013-03-08 06:37:00
shiliyusly
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 265.4
- 散金: 17
- 红花: 1
- 帖子: 138
- 在线: 71.5小时
- 虫号: 1434769
- 注册: 2011-10-10
- 专业: 食品科学基础
7楼2013-03-08 21:32:43
shiliyusly
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 265.4
- 散金: 17
- 红花: 1
- 帖子: 138
- 在线: 71.5小时
- 虫号: 1434769
- 注册: 2011-10-10
- 专业: 食品科学基础
9楼2013-03-09 09:13:37
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
shiliyusly: 金币+3 2013-03-09 15:00:31
shiliyusly: 金币+2, 2 2013-03-12 21:40:18
shiliyusly: 金币+3 2013-03-09 15:00:31
shiliyusly: 金币+2, 2 2013-03-12 21:40:18
|
差不多有90%，应该能凑合着用。实在不喜欢就换引物试试。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
shiliyusly10楼2013-03-09 11:09:28
