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shiliyusly新虫 (小有名气)
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QPCR之引物设计(二)
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大家好，我做QPCR扩增效率的时候遇到一个基因，之前测得的CT值是30左右，退火温度是54度，溶解曲线如图1。 我现在补做扩增效率，体系试剂什么都是一样的，可是测得的相同样品的CT值基本都在33左右我试过51-57度退火温度，扩增效率很低，连拟合度都不好，CT值比较低，我用的是2倍稀释度，怕是稀释不准，后来重复了几次，但结果依然不是很好。溶解曲线如图2。 大家看这是什么原因呢，感觉引物质量是还好吧？是要换引物吗？  图2.jpg  图1.jpg |
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差不多有90%，应该能凑合着用。实在不喜欢就换引物试试。 |
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shiliyusly10楼2013-03-09 11:09:28
