应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 两次qPCR结果相差太大。。。。U6 Ct值应该是多少
91/1返回列表
查看: 6212  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

louisa俊

银虫 (小有名气)

[求助] 两次qPCR结果相差太大。。。。U6 Ct值应该是多少

最近做了2次qPCR,结果相差太大。。。用的内参是U6，发现U6的数值相差太大，想请教一下U6 的Ct值究竟是多少？为什么两次实验U6的Ct值会相差那么多？？还有就是引物能用DEPC水稀释吗？？对引物有没有影响？？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-04 21:47:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
louisa俊(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-05 11:42:26
CT值依据加入模板量，如果相差太大应该是操作的问题，最大的可能是加入模板的量不太一致，即加模板时枪头里没打干净。引物可以用灭菌水直接稀释。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-05 07:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

froess

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
louisa俊(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-05 11:42:34
首先你提出的问题有些不严谨，其实对于种属之间U6的表达量是有差异的。建议保证实验条件相同。如果你保证前后实验条件相同，那我觉得有个很严重的问题，U6在你做的实验中表达不稳定，所以导致相差太大。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-06-05 10:37:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 鼓励 2013-06-09 14:12:06
可以用来做内参的基因很多，到底用哪个基因做内参需要看你的模板来源，有一个专门的内参选择软件，但可以用来做内参的一般是表达量高且表达水平比较恒定的基因，你这个U6不知道符不符合条件，另外引物直接用灭菌水稀释，一点影响都没有
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-05 15:25:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2013-06-05 07:56:58
CT值依据加入模板量，如果相差太大应该是操作的问题，最大的可能是加入模板的量不太一致，即加模板时枪头里没打干净。引物可以用灭菌水直接稀释。

恩。非常感谢。下次加样的时候，我会尽量保持一致，谢谢！！
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-06 09:00:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-05 15:25:32
可以用来做内参的基因很多，到底用哪个基因做内参需要看你的模板来源，有一个专门的内参选择软件，但可以用来做内参的一般是表达量高且表达水平比较恒定的基因，你这个U6不知道符不符合条件，另外引物直接用灭菌水稀 ...

我们做的基因一直是用U6做内参的，qPCR的结果，有两个U6值是17点几。还有一个突然变成20几了，我觉得这样的结果是不正常的
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-06 09:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by froess at 2013-06-05 10:37:49
首先你提出的问题有些不严谨，其实对于种属之间U6的表达量是有差异的。建议保证实验条件相同。如果你保证前后实验条件相同，那我觉得有个很严重的问题，U6在你做的实验中表达不稳定，所以导致相差太大。

U6表达不稳定？？？？？U6是内参，一般来说，都是稳定表达的啊
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-06 09:02:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

froess

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by louisa俊 at 2013-06-06 09:02:52
U6表达不稳定？？？？？U6是内参，一般来说，都是稳定表达的啊...

U6是内参没错，但在某些组织里，它也并非稳定表达。只是提出疑问，你可以再找找文献哈
赞一下 回复此楼
8楼2013-06-09 12:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by froess at 2013-06-09 12:38:08
U6是内参没错，但在某些组织里，它也并非稳定表达。只是提出疑问，你可以再找找文献哈...

好的，谢谢哈
回复此楼
9楼2013-06-09 15:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 louisa俊 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭