应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » IQ5 RT-QPCR问题求助
91/1返回列表
查看: 1673  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jingdanlong

新虫 (初入文坛)

[求助] IQ5 RT-QPCR问题求助

我用IQ5做了几次荧光定量-pcr预实验，但是结果总是显示基因的表达量一样。是不是我的plate设置有问题？还有就是为什么基因表达显示会一样呢，情动这块的同学们帮忙解答一下。

板面设置，绿色为ACTIN，蓝色为目的基因






actin 溶解曲线



目的基因-溶解曲线



基因输出结果
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-23 18:35:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励应助！ 2012-04-23 22:24:16
楼主应该注意到面板上标示圆形的孔为做引物标曲用的。方形的孔代表做实验组的样品。楼主既做标曲又做实验组基因表达，不知这样设置对不对，反正我是没这样搞过？若是可以，还请高手指教
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-23 20:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingdanlong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-23 20:10:12:
楼主应该注意到面板上标示圆形的孔为做引物标曲用的。方形的孔代表做实验组的样品。楼主既做标曲又做实验组基因表达，不知这样设置对不对，反正我是没这样搞过？若是可以，还请高手指教

那应该怎么标示呢，我设计的第一个sybr1是ACTIN的标准曲线和不同部位的ACTIN，而后面的sybr2是目的基因的标准曲线和不同部位的目的基因。
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-23 21:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜: 金币+1, 应助指数+1, 专家考核, 呵呵，孙版主用过不少机器嘛 2012-04-23 22:24:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by jingdanlong at 2012-04-23 21:08:37:
那应该怎么标示呢，我设计的第一个sybr1是ACTIN的标准曲线和不同部位的ACTIN，而后面的sybr2是目的基因的标准曲线和不同部位的目的基因。

你应该统一选啊，比如你做标曲，就选择stand按钮，也就是圆的。你做相对表达量，就选X，即方的按钮。不能方的圆的一起选啊
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

jingdanlong
4楼2012-04-23 21:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingdanlong

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-23 21:37:56:
你应该统一选啊，比如你做标曲，就选择stand按钮，也就是圆的。你做相对表达量，就选X，即方的按钮。不能方的圆的一起选啊

好的，其实我这样试过了，但结果还是一样的。谢谢你啊！
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-24 15:55:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jane_618

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-28 08:32:46
最近我也在用这个。疑惑lz为什么使用SYBR1和SYBR2两种染料。。。另外，我们都是得到Ct值之后自己计算相对表达量的。。。。
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-27 18:26:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingdanlong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Jane_618 at 2012-04-27 18:26:55:
最近我也在用这个。疑惑lz为什么使用SYBR1和SYBR2两种染料。。。另外，我们都是得到Ct值之后自己计算相对表达量的。。。。

恩，你们也是用的iq5吗？
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-05 22:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingdanlong

新虫 (初入文坛)
8楼2012-05-05 22:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jane_618

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Jane_618 at 2012-04-27 18:26:55:
最近我也在用这个。疑惑lz为什么使用SYBR1和SYBR2两种染料。。。另外，我们都是得到Ct值之后自己计算相对表达量的。。。。

嗯 是iQ5
回复此楼
9楼2012-05-06 09:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jingdanlong 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭