24小时热门版块排行榜    

查看: 9266  |  回复: 4

找自己123

铁虫 (小有名气)

[求助] qPCR 内参 差异大 已有2人参与

qPCR 我的内参做出来 Ct值差很多,生物学重复内参都有差很多的 ,肿么个情况这是。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

OmicsLink

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-14 08:35:30
一般Ct值在15~35之间比较理想,Ct值过小,说明模板浓度过高,需要稀释;Ct值过大,说明模板浓度过低,需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因,如果Ct值差过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,至少可以说明目标基因表达非常低,甚至该样品不适合做相对定量,而是需要绝对定量。希望能帮到你。
一切有为法,如露如闪电
2楼2014-05-13 17:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

找自己123

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by OmicsLink at 2014-05-13 17:26:20
一般Ct值在15~35之间比较理想,Ct值过小,说明模板浓度过高,需要稀释;Ct值过大,说明模板浓度过低,需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因,如果Ct值差过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值 ...

我不同组之间 跑出来的 内参Ct 有些差很多,这是内参不稳定造成的还是什么原因
3楼2014-05-13 22:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

OmicsLink

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 找自己123 at 2014-05-13 22:54:38
我不同组之间 跑出来的 内参Ct 有些差很多,这是内参不稳定造成的还是什么原因...

RNA的量不稳定了也有可能。
一切有为法,如露如闪电
4楼2014-05-14 10:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个内参试试,qPCR可以参照MIQE标准来做,文章更容易发出来

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-14 10:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 找自己123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +16 基诺咪客 2026-08-17 20/1000 2026-08-20 12:44 by 201120518022
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见