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找自己123

铁虫 (小有名气)

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[求助] qPCR 内参差异大已有2人参与

qPCR 我的内参做出来 Ct值差很多，生物学重复内参都有差很多的，肿么个情况这是。

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1楼 2014-05-13 16:37:47

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OmicsLink

银虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
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专业: 中药制剂

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-14 08:35:30

一般Ct值在15~35之间比较理想，Ct值过小，说明模板浓度过高，需要稀释；Ct值过大，说明模板浓度过低，需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因，如果Ct值差过大，用内参基因来衡量目标基因的表达量（绝对值）就不完全可靠，至少可以说明目标基因表达非常低，甚至该样品不适合做相对定量，而是需要绝对定量。希望能帮到你。

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一切有为法，如露如闪电

2楼2014-05-13 17:26:20

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找自己123

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by OmicsLink at 2014-05-13 17:26:20
一般Ct值在15~35之间比较理想，Ct值过小，说明模板浓度过高，需要稀释；Ct值过大，说明模板浓度过低，需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因，如果Ct值差过大，用内参基因来衡量目标基因的表达量（绝对值 ...

我不同组之间跑出来的内参Ct 有些差很多，这是内参不稳定造成的还是什么原因

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3楼2014-05-13 22:54:38

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