24小时热门版块排行榜    

查看: 9271  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

找自己123

铁虫 (小有名气)

[求助] qPCR 内参 差异大 已有2人参与

qPCR 我的内参做出来 Ct值差很多,生物学重复内参都有差很多的 ,肿么个情况这是。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

找自己123

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by OmicsLink at 2014-05-13 17:26:20
一般Ct值在15~35之间比较理想,Ct值过小,说明模板浓度过高,需要稀释;Ct值过大,说明模板浓度过低,需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因,如果Ct值差过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值 ...

我不同组之间 跑出来的 内参Ct 有些差很多,这是内参不稳定造成的还是什么原因
3楼2014-05-13 22:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

OmicsLink

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-14 08:35:30
一般Ct值在15~35之间比较理想,Ct值过小,说明模板浓度过高,需要稀释;Ct值过大,说明模板浓度过低,需要浓缩。通常的内参基因是表达量较高的持家基因,如果Ct值差过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,至少可以说明目标基因表达非常低,甚至该样品不适合做相对定量,而是需要绝对定量。希望能帮到你。
一切有为法,如露如闪电
2楼2014-05-13 17:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

OmicsLink

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 找自己123 at 2014-05-13 22:54:38
我不同组之间 跑出来的 内参Ct 有些差很多,这是内参不稳定造成的还是什么原因...

RNA的量不稳定了也有可能。
一切有为法,如露如闪电
4楼2014-05-14 10:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个内参试试,qPCR可以参照MIQE标准来做,文章更容易发出来

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-14 10:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 科研孤儿太难了 +13 我4大白菜 2026-08-20 14/700 2026-08-20 21:28 by 一碗砂锅米线
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见