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PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测,泳道很亮是什么原因?
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wu-ke-da
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PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测,泳道很亮是什么原因?
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PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测,泳道很亮比条带还亮是什么原因?
如图所示,见过这种现象的大神麻烦留下脚印。
琼脂糖凝胶电泳结果.jpg
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2014-11-14 20:22:45
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2014-11-15 14:44:07
也有可能模板浓度太高,引起太多非特异扩增
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4楼
2014-11-15 08:49:00
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1、延伸时间过长;
2、凝胶成像仪灯调暗点,谢谢!
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永远相信未知的总是美好的!
9楼
2014-11-15 15:17:48
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楼上正解,总之就是非特异的扩增
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急速潜航~
3楼
2014-11-15 01:53:19
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:
Originally posted by
txing
at 2014-11-15 08:49:00
也有可能模板浓度太高,引起太多非特异扩增
一般50ul体系的话,模板加1ul可以吗?
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7楼
2014-11-15 11:39:43
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:
Originally posted by
fuyuandj86
at 2014-11-15 01:19:44
就是什么都没P出来
要么就是循环数太高了
但是感觉下面好像有条带,只是条带比较虚弱
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8楼
2014-11-15 11:41:11
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:
Originally posted by
wu-ke-da
at 2014-11-18 10:43:47
不会吧?!最不想发生的事还是得发生呀...
这个东西,即使你改进方法,也不会有很好的结果的,这个你可以试试减少点酶的量,那个泳道可能会好点,但是不会有什么实质性的变化的
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快乐是最重要的。。。。。。
17楼
2014-11-18 11:26:52
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1. 降低模板浓度,按原来的1/5或 1/10分别P一次,这个不能按微升来,要按浓度来。
2. 提高退火温度,按2摄氏度的梯度增加试试。
这两方面调整一下,一般就没问题了。你试试看。
p.s. 上面太亮你就把光圈减小,看看上面是弥散的还是一个个条带,有助于分析。这么亮,要瞎了……
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18楼
2014-11-18 11:44:44
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模板量太多,先稀释十倍再试一下,大多数都是这个原因
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27楼
2015-04-17 09:33:34
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2014-11-15 14:43:57
就是什么都没P出来
要么就是循环数太高了
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2014-11-15 01:19:44
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fuyuandj86
at 2014-11-15 01:19:44
就是什么都没P出来
要么就是循环数太高了
哦,谢谢,一般循环30次算不算高?
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2014-11-15 11:38:45
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at 2014-11-15 01:53:19
楼上正解,总之就是非特异的扩增
除了提高退火温度,还要怎样避免这个问题呢
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