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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮是什么原因？
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮是什么原因？ 已有13人参与

PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮比条带还亮是什么原因？
     如图所示，见过这种现象的大神麻烦留下脚印。

PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮是什么原因？
琼脂糖凝胶电泳结果.jpg
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-11-14 20:22:45
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yipu0222

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1. 降低模板浓度，按原来的1/5或 1/10分别P一次，这个不能按微升来，要按浓度来。
2. 提高退火温度，按2摄氏度的梯度增加试试。
这两方面调整一下，一般就没问题了。你试试看。
p.s. 上面太亮你就把光圈减小，看看上面是弥散的还是一个个条带，有助于分析。这么亮，要瞎了……
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18楼2014-11-18 11:44:44
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:43:57
就是什么都没P出来
要么就是循环数太高了
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-11-15 01:19:44
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SundayMilk

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上正解，总之就是非特异的扩增

[ 发自小木虫客户端 ]
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急速潜航~
3楼2014-11-15 01:53:19
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txing

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:44:07
也有可能模板浓度太高，引起太多非特异扩增
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2014-11-15 08:49:00
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