| 查看: 1770 | 回复: 4 | ||
ggyy0911铁虫 (正式写手)
|
[求助]
带酶切位点的片段连接平末端载体后，还能从平末端载体上酶切下来吗？ 已有1人参与
|
|
用高保真扩一个3000的片段，然后要酶切连表达载体。 想了一个办法觉得比较省事，但不知道可不可行，请大家帮我看看： 我用带酶切位点的引物扩增我的目的片段，扩增出来的片段就应该是带有酶切位点的片段，末端是平末端。然后我连接平末端载体，由于片段上已经带有酶切位点，我再用酶把这个片段切下来，连接表达载体。 当然更省事的办法是直接连表达载体，但是之前实验室同门做过，测序结果不好。 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有113人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pet32a做载体，结果这一块做了三个月了还没连接成功
已经有30人回复
- 双酶切后如何才能让载体自连？
已经有6人回复
- BamHI,SmaI平末端粘性末端连接问题
已经有11人回复
- BsaI的酶切位点怎么看？
已经有4人回复
- 平末端加A尾连接T载体的问题
已经有14人回复
- 求助：载体用Nhe1和Sma1双酶切，片段用Nhe1单酶切，两者能连上吗？
已经有6人回复
- 关于使载体平末端环化的问题
已经有14人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 片段总是连不到T载体上
已经有22人回复
- 目的片段和T载体连接后PCR条带诡异
已经有16人回复
- 酶切后的补平连接
已经有9人回复
- 有没有用过XmnI这个酶的?酶切后连接需要注意什么问题么？
已经有12人回复
- 平末端连接不上，求助
已经有21人回复
- 关于平末端连接
已经有14人回复
- 大侠们，帮我看一下这对引物的酶切位点是什么？
已经有20人回复
- 酶切位点不同，构建载体
已经有9人回复
- 平端 影响连接吗
已经有8人回复
- 求助：Xho 1 单酶切 载体连接
已经有19人回复
- 平末端连接，连上了，很多转化子中没有一个正确的，怎么办？
已经有13人回复
- 双酶切粘性末端连接不上
已经有21人回复
- 平末端连接做不出来克隆
已经有30人回复
- 虚心请教关于平—粘末端的连接问题
已经有18人回复
- 129bp小片段从pGEM-T上酶切回收的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于酶切产物连接的一点问题
已经有13人回复
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 25566.4
- 散金: 410
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 7621
- 在线: 966小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
2楼2014-11-11 10:22:39
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
3楼2014-11-11 10:42:34
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 25566.4
- 散金: 410
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 7621
- 在线: 966小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
4楼2014-11-11 10:48:23
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
5楼2014-11-11 12:07:51
30