24小时热门版块排行榜    

查看: 3414  |  回复: 21

2011jonathan

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

vonstar

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的19T应该用了有一段时间吧,我试过里面的酶反复冻融过5次以上,效果特别不好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2014-11-03 00:24:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圆yy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流! 2014-11-02 21:59:30
内容已删除
7楼2014-11-02 21:44:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+4, 鼓励交流! 2014-11-02 21:59:21
好歹应该有点自连的啊,楼主这个可能原因就很多了~
第一 有可能是你感受态的问题,感受态找个其他质粒验证一下效率,不好用的话就换吧
第二 楼主你好好看看抗生素有没有用错,不管是种类还是用量,PMD19T的话我记得是氨苄青霉素,100纳克/ml的终浓度吧
第三 你PCR扩增完之后做胶回收或者PCR回收没有?没有的话回收DNA之后再来做连接,同时记得片段/载体摩尔数比是3:1-5:1
4楼2014-11-02 12:12:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-04 22:50:29
1、感受态转化完活化了吗?
2、热击时间是不是过长了,我用pMD19-T连接2Kb片段,热击45s就够了。
3、无菌操作的时候有没有离酒精灯太近了,把菌烤死了,我师妹之前做的时候,害怕染菌就出现过这种情况。
你的问题是由于转化或者培养中那个地方没有注意到造成的。
9楼2014-11-03 00:10:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有,在感受态刚刚冻融时效果最好。但感受态细胞十分脆弱,要避免剧烈的操作,不要用枪头反复抽打混匀、涡旋、离心混匀,这样容易造成细胞破裂。只可以用手指轻弹EP管。
10楼2014-11-03 00:16:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

SundayMilk

银虫 (初入文坛)

问下楼主用Extaq的理由?

[ 发自小木虫客户端 ]
急速潜航~
2楼2014-11-02 10:13:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011jonathan

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2014-11-02 11:15:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-11-02 22:36:46
我最近也在连,也是遇到同样的问题,连不上,不过我的载体有几次都自连了···
···
5楼2014-11-02 12:38:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011jonathan

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2014-11-02 14:02:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SundayMilk

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
作对照确定问题出在哪。

[ 发自小木虫客户端 ]
急速潜航~
8楼2014-11-02 23:52:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2011jonathan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +9 瞬息宇宙 2026-08-12 9/450 2026-08-13 10:12 by Vivilian
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见