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1楼2014-11-02 09:40:05

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vonstar

银虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

你的19T应该用了有一段时间吧，我试过里面的酶反复冻融过5次以上，效果特别不好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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12楼2014-11-03 00:24:39

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圆yy

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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7楼2014-11-02 21:44:13

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weigh1111

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【答案】应助回帖

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好歹应该有点自连的啊，楼主这个可能原因就很多了~
第一有可能是你感受态的问题，感受态找个其他质粒验证一下效率，不好用的话就换吧
第二楼主你好好看看抗生素有没有用错，不管是种类还是用量，PMD19T的话我记得是氨苄青霉素，100纳克/ml的终浓度吧
第三你PCR扩增完之后做胶回收或者PCR回收没有？没有的话回收DNA之后再来做连接，同时记得片段/载体摩尔数比是3:1-5：1

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4楼2014-11-02 12:12:58

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