| 查看: 1170 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
PCR反应体系改变会导致电泳不出带吗已有2人参与
|
||
 以反转录后的cDNA为模板，在扩增管家基因（18s RNA）的时候，刚开始用的是10μl反应体系，体系中用的是PCR Mix，电泳后有出现条带。但由于是新手的关系，忘记加空白对照跟Marker，加上电泳时间长了一点，所以无法确定P出来的条带是否为目的的管家基因。因此，后来又重新做了一次实验，这次用的是25μl反应体系，而且没有用PCR Mix，用的是HSTaq酶。就只是改变了反应体系，PCR反应条件一直没有改变，但是电泳后跑不出条带。10μl反应体系： 25μl反应体系: PCR Mix 5 10X Buffer 2.5 Pf 0.2 dNTPs 2 pr 0.2 pf 0.2 cDNA 0.5 pr 0.5 ddH2O 4.1 Taq 0.125 cDNA 1 ddH2O 18.675 total 10 μl total 25μl 请问各位高手，是哪里出了问题。  10μl反应体系电泳图.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有84人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
PCR电泳条带为什么会这样？（附图）
已经有10人回复- 引物浓度不一致会导致PCR无扩增带么？
已经有7人回复
- 电泳图引物条带很亮，目的产物条带不亮
已经有8人回复
- 关于PCR反应液纯化回收后再电泳的问题
已经有6人回复
- PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？
已经有13人回复
- 跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现
已经有14人回复
- 急！各位帮忙看看，PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图，条带不清晰原因是什么？
已经有16人回复
- 提取DNA后，PCR电泳无条带
已经有5人回复
- PCR电泳图求解
已经有13人回复
- 普通的PCR，一样的体系、程序，为什么结果不同？
已经有22人回复
- PCR产物直接双酶切后电泳看不到条带
已经有30人回复
- PCR扩增不出目的条带
已经有12人回复
- PCR不出目的条带的原因
已经有12人回复
- 为什么做PCR时候模板浓度高了会扩增不出目的片段？
已经有11人回复
- PCR反应体系求助
已经有10人回复
- 总dna电泳有条带，但PCR后只有引物二聚体
已经有23人回复
- 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解
已经有18人回复
- PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？
已经有24人回复
- 流感病毒RT-PCR，电泳老是跑不出条带~~~纠结！
已经有5人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- PCR后电泳条带异常
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR反应体系请教！
已经有13人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
6楼2015-01-17 00:17:34
peterrjp
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 65 (初中生)
- 金币: 24487.5
- 红花: 16
- 帖子: 2608
- 在线: 67小时
- 虫号: 395640
- 注册: 2007-06-08
- 性别: GG
- 专业: 微生物生态学
2楼2014-10-20 16:42:02
3楼2014-10-20 17:21:04
peterrjp
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 65 (初中生)
- 金币: 24487.5
- 红花: 16
- 帖子: 2608
- 在线: 67小时
- 虫号: 395640
- 注册: 2007-06-08
- 性别: GG
- 专业: 微生物生态学
4楼2014-10-20 19:27:51