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1楼2014-09-07 18:59:13

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shengwumin

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我分析的原因：
右边的条带上宽下窄：下面的胶没有融好。
弥散的原因：你制胶时，胶的温度太高，你应该冷却到不是很烫手的时候，开始制胶。

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believeyourself! come on .

5楼2014-09-08 11:13:57

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bwangel

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胶的问题，那个区域胶没溶透吧

2楼2014-09-08 08:24:44

kehan777

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弥散的问题，我会少加点模版，提高退火温度；配胶时胶要熔好，胶可以用水冷却但不要过，跑胶时电压再降低一些..

3楼2014-09-08 09:00:35

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是PCR体系不同引起的

朝着自己的理想奔跑，就是幸福！

4楼2014-09-08 09:46:49

yuren2009

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拖尾和弥散，改变下PCR体系，试着降低模板和酶用量，反应程序中提高下退火温度。

学习使你立于不败之地

6楼2014-09-08 16:49:24

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不太可能胶的问题吧，中间那个MARKER都没问题怎么可能胶问题？上样量调整试试

[ 发自小木虫客户端 ]

7楼2014-09-09 11:45:26

hihe99

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引用回帖:

5楼: Originally posted by shengwumin at 2014-09-08 12:13:57
我分析的原因：
右边的条带上宽下窄：下面的胶没有融好。
弥散的原因：你制胶时，胶的温度太高，你应该冷却到不是很烫手的时候，开始制胶。

请问下弥散跟制胶温度有关，为什么啊？能说具体点不，谢谢！

8楼2014-09-09 21:09:43

冰尘子

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西门吹雪170: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:52:13

首先看你用什么染的色？使用EB染色,仅当载样量≥50ng时,条带出现轻微扭曲,扭曲程度与电压无明显关系。若要避免DNA条带扭曲干扰实验结果,使用GoldViewna II染色,若DNA载样量≥10ng,应控制电压≤5V/cm;使用EB染色,载样量应≤50ng;使用GoldView染色,可以使用20V/cm的电压缩短实验时间

走好人生路

9楼2014-09-09 21:25:11

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引用回帖:

9楼: Originally posted by 冰尘子 at 2014-09-09 21:25:11
首先看你用什么染的色？使用EB染色,仅当载样量≥50ng时,条带出现轻微扭曲,扭曲程度与电压无明显关系。若要避免DNA条带扭曲干扰实验结果,使用GoldViewna II染色,若DNA载样量≥10ng,应控制电压≤5V/cm;使用EB染色,载样 ...

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