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PCR反应体系改变会导致电泳不出带吗已有2人参与
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 以反转录后的cDNA为模板，在扩增管家基因（18s RNA）的时候，刚开始用的是10μl反应体系，体系中用的是PCR Mix，电泳后有出现条带。但由于是新手的关系，忘记加空白对照跟Marker，加上电泳时间长了一点，所以无法确定P出来的条带是否为目的的管家基因。因此，后来又重新做了一次实验，这次用的是25μl反应体系，而且没有用PCR Mix，用的是HSTaq酶。就只是改变了反应体系，PCR反应条件一直没有改变，但是电泳后跑不出条带。10μl反应体系： 25μl反应体系: PCR Mix 5 10X Buffer 2.5 Pf 0.2 dNTPs 2 pr 0.2 pf 0.2 cDNA 0.5 pr 0.5 ddH2O 4.1 Taq 0.125 cDNA 1 ddH2O 18.675 total 10 μl total 25μl 请问各位高手，是哪里出了问题。  10μl反应体系电泳图.jpg |
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6楼2015-01-17 00:17:34