24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7547  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

daohaode4188

金虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑胶为什么会出现这样的情况? 已有3人参与

如图,3kb多的条带,之前用一模一样的体系,可以P出来,但是最近就出不来了,酶,buffer没问题,引物也重新换了一下,胶用0.8%,1%,1.5%的也都试了下,还是跑不出来条带,想知道是什么原因额
第一张图的Maker左边。左右两边除了引物和P的大小不一样,用的体系都是一样的;
第二张图,有一些在点样孔里,不知道是什么情况;
第三张图是之前一模一样的体系P出来的

PCR后跑胶为什么会出现这样的情况?
第一张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况?-1
第二张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况?-2
第三张图
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

pcr电泳图相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:55
拖尾的话可能是电压问题,我之前较高电压跑的时候也会出现这种问题,降了电压之后就很少见了···还有就是如果用质粒P的话,不要按计算的DNA浓度加,只要加很少就行了,要不然P不出来,或者很多杂带···
···
6楼2014-10-22 19:52:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

cookiehuang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:46
如果酶没有问题的话,首先要确定引物和质粒有没有问题,我有次质粒放久了再用就这样
胶孔残留可能是胶的问题,避免用现成的胶,现配现用
2楼2014-10-18 15:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daohaode4188

金虫 (小有名气)

之前能跑出来条带的时候,都可以看到引物二聚体,现在连引物二聚体都看不到
3楼2014-10-18 21:20:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:50
不用管以前p不p得出来,建议:1减少模板量;2提高退火温度,或者做一个温度梯度,感觉你的问题是退火温度不够。至于没有了引物二聚体,你看你做出来的有那么多非特异性的弥散亮带,引物早就被用完了。
4楼2014-10-18 22:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +7 好好休息好不好 2026-04-09 9/450 2026-04-09 22:28 by lbsjt
[考研] 297求调剂 +26 GENJIOW 2026-04-07 29/1450 2026-04-09 21:00 by 286640313
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+11 化工人999 2026-04-09 36/1800 2026-04-09 20:57 by lbsjt
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +19 土豆er? 2026-04-09 20/1000 2026-04-09 20:33 by maddjdld
[考研] 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-08 3/150 2026-04-09 15:51 by wp06
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 机械工程264学硕求调剂 +3 qiushangxian 2026-04-06 3/150 2026-04-08 01:53 by Linzejun
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 312求调剂 +4 LR6 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:42 by jp9609
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 生物与医药调剂 +4 十七sa 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:05 by lys0704
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 322求调剂 +6 FZAC123 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:23 by 科研小专家
信息提示
请填处理意见