应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？
71/1返回列表
查看: 7546  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

daohaode4188

金虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？ 已有3人参与

如图，3kb多的条带，之前用一模一样的体系，可以P出来，但是最近就出不来了，酶，buffer没问题，引物也重新换了一下，胶用0.8%，1%，1.5%的也都试了下，还是跑不出来条带，想知道是什么原因额
第一张图的Maker左边。左右两边除了引物和P的大小不一样，用的体系都是一样的；
第二张图，有一些在点样孔里，不知道是什么情况；
第三张图是之前一模一样的体系P出来的

PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？
第一张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？-1
第二张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？-2
第三张图
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

pcr电泳图相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-18 10:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cookiehuang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:46
如果酶没有问题的话，首先要确定引物和质粒有没有问题，我有次质粒放久了再用就这样
胶孔残留可能是胶的问题，避免用现成的胶，现配现用
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-18 15:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daohaode4188

金虫 (小有名气)
之前能跑出来条带的时候，都可以看到引物二聚体，现在连引物二聚体都看不到
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-18 21:20:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:50
不用管以前p不p得出来，建议：1减少模板量；2提高退火温度，或者做一个温度梯度，感觉你的问题是退火温度不够。至于没有了引物二聚体，你看你做出来的有那么多非特异性的弥散亮带，引物早就被用完了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-18 22:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forAM

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junior850621 at 2014-10-18 22:16:08
不用管以前p不p得出来，建议：1减少模板量；2提高退火温度，或者做一个温度梯度，感觉你的问题是退火温度不够。至于没有了引物二聚体，你看你做出来的有那么多非特异性的弥散亮带，引物早就被用完了。

也有可能退火温度过高，引物结合不上去，可以试试降低退火温度。
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-22 18:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:55
拖尾的话可能是电压问题，我之前较高电压跑的时候也会出现这种问题，降了电压之后就很少见了···还有就是如果用质粒P的话，不要按计算的DNA浓度加，只要加很少就行了，要不然P不出来，或者很多杂带···
赞一下 回复此楼
···
6楼2014-10-22 19:52:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

派派_Ida

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-22 19:52:56
拖尾的话可能是电压问题，我之前较高电压跑的时候也会出现这种问题，降了电压之后就很少见了···还有就是如果用质粒P的话，不要按计算的DNA浓度加，只要加很少就行了，要不然P不出来，或者很多杂带···

我也是这种情况，如图一，请问楼主最后怎么解决的
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-19 11:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 daohaode4188 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +25 阳阳哇塞 2026-04-07 25/1250 2026-04-09 20:32 by only周
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 15:17 by 探123
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 298求调剂 +4 manman511 2026-04-05 4/200 2026-04-08 16:50 by tjzhao
[考研] 315求调剂 +17 欣喜777 2026-04-04 18/900 2026-04-08 13:54 by hangsimei
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-06 4/200 2026-04-07 20:06 by shanqishi
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 材料工程302分求调剂 +13 zyx上岸！ 2026-04-04 13/650 2026-04-07 11:14 by 诗与自由
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
[考研] 306分材料与化工求调剂 +7 黎吧啦啦你很有� 2026-04-03 7/350 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭