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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？
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daohaode4188

金虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？已有3人参与

如图，3kb多的条带，之前用一模一样的体系，可以P出来，但是最近就出不来了，酶，buffer没问题，引物也重新换了一下，胶用0.8%，1%，1.5%的也都试了下，还是跑不出来条带，想知道是什么原因额
第一张图的Maker左边。左右两边除了引物和P的大小不一样，用的体系都是一样的；
第二张图，有一些在点样孔里，不知道是什么情况；
第三张图是之前一模一样的体系P出来的

PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？
第一张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？-1
第二张图


PCR后跑胶为什么会出现这样的情况？-2
第三张图
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1楼2014-10-18 10:56:01
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-23 12:34:50
不用管以前p不p得出来，建议：1减少模板量；2提高退火温度，或者做一个温度梯度，感觉你的问题是退火温度不够。至于没有了引物二聚体，你看你做出来的有那么多非特异性的弥散亮带，引物早就被用完了。
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4楼2014-10-18 22:16:08
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