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DMZ3

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR产物跑胶跑不动,什么原因?

本人以重组质粒PET28a(约7000bp)为模板,利用PCR进行定点突变(全质粒定点饱和突变),但是PCR产物跑胶跑不动,仍在点样孔里,marker(takara,15000)跑的还不错,这是为什么?请高手指教!
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助 谢谢,我问了好多人,大部分不知道什么原因,只有一个博士师姐说蛋白污染。 2012-03-02 17:33:56
貌似你的模板太不纯了,混有的蛋白太多了。
总有一天我要修改用户名。
2楼2012-03-01 19:02:58
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
DMZ3(金币+2): 有帮助 嗯,看来是蛋白污染的,质粒没提好 2012-03-02 17:34:30
是不是蛋白缠绕啊~~
3楼2012-03-01 19:52:12
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助 现在看来,应该是模板没提好,我再重新提一下!谢谢! 2012-03-02 17:35:25
模板不纯,最好用kit纯化了,再做突变。
4楼2012-03-01 21:55:09
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白没抽提干净吧?
jiayoubashaonian
5楼2012-03-01 22:45:16
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hongqifei

木虫 (小有名气)

我也遇到过这种问题。
何须剑道争锋?千人指,万人封,可问江湖鼎峰,三尺秋水尘不染,天下无双。
6楼2012-03-01 22:55:19
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2012xin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
DMZ3(金币+2): 2012-03-02 17:35:45
是蛋白质没有抽提干净的可能很大。。
7楼2012-03-02 16:01:12
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chinahzd

新虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励新虫 2012-03-17 14:59:28
蛋白不存~~~
8楼2012-03-02 16:08:13
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DMZ3

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by chinahzd at 2012-03-02 16:08:13:
蛋白不存~~~

嗯,现在看来是模板不纯,受到蛋白质污染了。但是我没金币发给你了,下次你再来回答问题,我补给你多多的!
9楼2012-03-02 17:38:43
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麻花13

新虫 (小有名气)

西瓜: , 可以发个新帖嘛 2012-03-17 14:59:53
我也出现了这样的问题啊,50ul体系,将产物纯化过后,依旧还是跑不动,而20ul体系却跑出目的条带了,请问是什么情况啊!!急
10楼2012-03-17 10:36:53
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