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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物跑胶跑不动，什么原因？
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DMZ3

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR产物跑胶跑不动，什么原因？

本人以重组质粒PET28a（约7000bp）为模板，利用PCR进行定点突变（全质粒定点饱和突变），但是PCR产物跑胶跑不动，仍在点样孔里，marker(takara,15000)跑的还不错，这是为什么？请高手指教！
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1楼 2012-03-01 18:38:02
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助 谢谢，我问了好多人，大部分不知道什么原因，只有一个博士师姐说蛋白污染。 2012-03-02 17:33:56
貌似你的模板太不纯了，混有的蛋白太多了。
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总有一天我要修改用户名。
2楼2012-03-01 19:02:58
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+2): ★有帮助 嗯，看来是蛋白污染的，质粒没提好 2012-03-02 17:34:30
是不是蛋白缠绕啊~~
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3楼2012-03-01 19:52:12
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助 现在看来，应该是模板没提好，我再重新提一下！谢谢！ 2012-03-02 17:35:25
模板不纯，最好用kit纯化了，再做突变。
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4楼2012-03-01 21:55:09
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白没抽提干净吧？
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jiayoubashaonian
5楼2012-03-01 22:45:16
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hongqifei

木虫 (小有名气)
我也遇到过这种问题。
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
6楼2012-03-01 22:55:19
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2012xin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+2): 2012-03-02 17:35:45
是蛋白质没有抽提干净的可能很大。。
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7楼2012-03-02 16:01:12
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chinahzd

新虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励新虫 2012-03-17 14:59:28
蛋白不存~~~
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8楼2012-03-02 16:08:13
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DMZ3

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by chinahzd at 2012-03-02 16:08:13:
蛋白不存~~~

嗯，现在看来是模板不纯，受到蛋白质污染了。但是我没金币发给你了，下次你再来回答问题，我补给你多多的！
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9楼2012-03-02 17:38:43
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麻花13

新虫 (小有名气)
西瓜: , 可以发个新帖嘛 2012-03-17 14:59:53
我也出现了这样的问题啊，50ul体系，将产物纯化过后，依旧还是跑不动，而20ul体系却跑出目的条带了，请问是什么情况啊！！急
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10楼2012-03-17 10:36:53
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