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DMZ3

铁虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

[求助] PCR产物跑胶跑不动，什么原因？

本人以重组质粒PET28a（约7000bp）为模板，利用PCR进行定点突变（全质粒定点饱和突变），但是PCR产物跑胶跑不动，仍在点样孔里，marker(takara,15000)跑的还不错，这是为什么？请高手指教！

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1楼 2012-03-01 18:38:02

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bbwalkman

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+2): ★有帮助嗯，看来是蛋白污染的，质粒没提好 2012-03-02 17:34:30

是不是蛋白缠绕啊~~

3楼2012-03-01 19:52:12

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查看全部 11 个回答

137167741

至尊木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助谢谢，我问了好多人，大部分不知道什么原因，只有一个博士师姐说蛋白污染。 2012-03-02 17:33:56

貌似你的模板太不纯了，混有的蛋白太多了。

总有一天我要修改用户名。

2楼2012-03-01 19:02:58

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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
DMZ3(金币+3): ★★★很有帮助现在看来，应该是模板没提好，我再重新提一下！谢谢！ 2012-03-02 17:35:25

模板不纯，最好用kit纯化了，再做突变。

4楼2012-03-01 21:55:09

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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

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专业: 植物学研究的新技术、新方

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

蛋白没抽提干净吧？

jiayoubashaonian

5楼2012-03-01 22:45:16

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