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PCR产物跑胶跑不动,什么原因?
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DMZ3
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PCR产物跑胶跑不动,什么原因?
本人以重组质粒PET28a(约7000bp)为模板,利用PCR进行定点突变(全质粒定点饱和突变),但是PCR产物跑胶跑不动,仍在点样孔里,marker(takara,15000)跑的还不错,这是为什么?请高手指教!
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2012-03-01 18:38:02
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DMZ3
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引用回帖:
楼
:
Originally posted by
chinahzd
at 2012-03-02 16:08:13:
蛋白不存~~~
嗯,现在看来是模板不纯,受到蛋白质污染了。但是我没金币发给你了,下次你再来回答问题,我补给你多多的!
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9楼
2012-03-02 17:38:43
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很有帮助 谢谢,我问了好多人,大部分不知道什么原因,只有一个博士师姐说蛋白污染。 2012-03-02 17:33:56
貌似你的模板太不纯了,混有的蛋白太多了。
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总有一天我要修改用户名。
2楼
2012-03-01 19:02:58
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有帮助 嗯,看来是蛋白污染的,质粒没提好 2012-03-02 17:34:30
是不是蛋白缠绕啊~~
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3楼
2012-03-01 19:52:12
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很有帮助 现在看来,应该是模板没提好,我再重新提一下!谢谢! 2012-03-02 17:35:25
模板不纯,最好用kit纯化了,再做突变。
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4楼
2012-03-01 21:55:09
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