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green1223

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】PCR产物电泳问题

1.电泳时出现跑不动的现象是什么原因呢? 有时候一个槽中  一块板可以跑动  另一块却迟迟不下去。我跑的时候功率只有8W,而别人的能跑动。功率是23W。


2.还有跑出来的条带是斜的是什么原因呢

[ Last edited by green1223 on 2010-11-5 at 10:48 ]
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

我一般设定电压
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-11-05 08:38:16
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辛雨237

铁杆木虫 (著名写手)

电泳液太少了吧
春暖花开
3楼2010-11-05 08:59:40
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langduiyue

银虫 (小有名气)

green1223(金币+1):你看看我的图片,你是说上槽要没过胶是吧 我没过了哈 2010-11-05 10:49:46
我 们 了也是调电压    一般到 180多。 楼上正解 电泳液是绝对不能少的。 太多也不好,多少没过胶即可。跑歪 多半是跑的过程中胶没有放正。
角逐自我
4楼2010-11-05 09:05:45
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keyanhrc

新虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-11-05 11:39:11
1.调电压,我们一般都用120V。
2.保证胶要完全浸入电泳液。
3.要根据你跑的样品来决定胶的浓度,如果相对于样品的分子大小,胶的浓度过大的话,样品会跑的很慢甚至跑不动。
4.样品跑斜了可能是跑的过程中你的胶移动了。最好把胶的整齐的一边紧贴电泳槽的一侧,这样就能防止在跑胶过程中胶不会移动。
5楼2010-11-05 11:01:39
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guixiaohua

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-05 23:51:08
本帖内容被屏蔽

6楼2010-11-05 11:44:34
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langduiyue

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-05 23:51:18
LZ 不好意思 我是按我们情况来的。 因为我们用的是平板胶。 你们好像是垂直的板。

不过人家的能跑而且功率比较高。  估计是夹的板有点问题。

希望LZ问题能尽快解决
角逐自我
7楼2010-11-05 11:46:42
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

你的功率是不不是有点小阿?还有跑谢了和灌胶液有影响啊!
8楼2010-11-05 21:11:10
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-05 23:51:29
green1223(金币+5):非常感谢你的帮助!我昨天试过了确实是底部有气泡。但弄了半天不知道怎么样才能让底部没气泡呢?我琼脂糖封底部--灌胶--去掉琼脂糖后胶的底部就用了空间,放缓冲时 就会在底部有空气 导致电流不通过有空气的地方! 2010-11-06 11:23:53
我做过和楼主一样的垂直板,提醒楼主注意两点,很重要,很可能是这两个原因中的一个:
第一,下面的封条取出来了吗?
第二,放胶的时候要从一端慢慢放下,要将两个板间的空气完全排出

如果这两个都不存在问题,那绝对是胶浓度有问题
我感觉别人跑的好,你跑的有问题,是因为没有人手把手教你,跟那些做得好的人走一遍吧
9楼2010-11-05 23:01:36
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