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纠结的面包

新虫 (初入文坛)

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[求助] 直接用DNA为模板进行荧光定量PCR可行吗？已有3人参与

作为刚接触分子生物的小白，老板也不太了解荧光定量PCR,只是给出任务说要用类似的方法检测土壤中产CA功能菌及CA表达的变化情况。因为土壤中提取RNA难度太高，所以放弃了检测CA表达量的变化，在看了相关文献后，看到有人说可以直接提取宏基因组，然后以特定功能基因为模板进行PCR之后制作质粒，通过和标准品CT值的对比可以得出功能菌的丰度变化情况，请问可行吗？

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1楼2014-09-08 16:22:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)

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专业: 生物化学

引用回帖:

5楼: Originally posted by 纠结的面包 at 2014-09-09 16:15:02
CA是碳酸酐酶，老板的意思是既然酶的表达量测定不出来，就想验证下产CA的典型菌的丰度和溶蚀量是不是成正比，目前是在研究一株从当地土壤中筛选出来的细菌，想着设计引物对CA基因进行PCR后制作质粒，通过和标准品曲 ...

这个事没问题的. 酶的表达量没办法测酶活或者做westernblot么?