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20111987

金虫 (正式写手)

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[求助] 做荧光定量PCR操作必须要在冰上进行吗？

做荧光定量PCR操作必须要在冰上进行吗？

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1楼 2012-10-09 09:11:58

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ypan

木虫 (著名写手)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

20111987: 回帖置顶 2012-10-12 15:05:51

是否需要在冰上操作，需要根据PCR酶。
如果是抗体修饰或者抗体结合的酶，最好在冰上加样，目前大部分用sybr Green做定量的酶（Mix）大多为此种酶，一般热启动时需要2～3分钟；
如果酶是化学修饰（即在编码酶的DNA水平做了改进），室温操作没有问题，这种酶多用于Taqman方法，一般热启动时需要10分钟预热。