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20111987

金虫 (正式写手)

[求助] 做荧光定量PCR操作必须要在冰上进行吗?

做荧光定量PCR操作必须要在冰上进行吗?
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)

不用,室温就行。跟普通PCR条件无差别。但是要注意环境的清洁,避免不必要的污染干扰实验结果!
勤能补拙
2楼2012-10-09 09:43:09
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20111987

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-10-09 09:43:09
不用,室温就行。跟普通PCR条件无差别。但是要注意环境的清洁,避免不必要的污染干扰实验结果!

好的,知道了,谢谢,我们实验室没冰,前两次都是到处借冰,楼主试过室温操作能出结果是吗?
3楼2012-10-09 10:24:04
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

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感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-09 14:41:41
建议还是在冰上进行,因为你的那个酶是需要在4度保存的,温度过高肯定会有影响的!
持之以恒、永不放弃!
4楼2012-10-09 10:34:01
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chenguestc

木虫 (职业作家)

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20111987: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-09 14:42:08
不需要。室温操作即可。CHEMICAL的保存可按照说明书,一般是保存于-20度而非4度
5楼2012-10-09 11:06:41
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wangxin1989

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-09 14:42:26
最好在冰上,自我感觉结果差异还是很明显的,用冰!
有梦就有希望
6楼2012-10-09 11:09:20
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hofo336699

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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20111987: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-10-09 14:42:32
要用冰,温度高了对酶有影响,我们所有的PCR都在冰盒上进行的,
懒虫啊!
7楼2012-10-09 11:34:43
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-10-09 11:06:41
不需要。室温操作即可。CHEMICAL的保存可按照说明书,一般是保存于-20度而非4度

那是因为咱们用的酶不一样!
持之以恒、永不放弃!
8楼2012-10-09 15:44:13
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 20111987 at 2012-10-09 10:24:04
好的,知道了,谢谢,我们实验室没冰,前两次都是到处借冰,楼主试过室温操作能出结果是吗?...

我的荧光实时定量PCR就是在室温操作的,结果挺好的!
勤能补拙
9楼2012-10-09 16:11:58
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-10-09 10:34:01
建议还是在冰上进行,因为你的那个酶是需要在4度保存的,温度过高肯定会有影响的!

室温不算“温度过高吧”,况且PCR的整个过程都是在较高的温度,聚合酶也没什么问题呀!  如果聚合酶在室温加样的时间都挺不过来的话,那PCR就不用做了!  你说呢!(聚合酶都是耐高温的,94℃变性过程都有问题)
勤能补拙
10楼2012-10-09 16:14:14
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