| 查看: 2058 | 回复: 4 | ||
[求助]
荧光定量PCR与巢式PCR能结合吗？主要怕扩增出同源基因。
|
背景 我要用qRT-PCR检测一个转进去基因的表达，但是那个基因已经被发现在目标植物中有三个同源基因，而且同源性特别高，碱基的相似性差不多有百分之九十左右。疑问1：巢式PCR似乎可以应对于这种相似性高的基因之间的区别，我也有搜到有文章有人把这个巢式PCR和荧光定量PCR结合，就是在巢式第一次PCR之后，稀释产物，再做第二次PCR，第二次PCR中加入taqman探针用荧光定量PCR仪检测。但是我不明白的是这种方法里，第一次PCR时，产物的量会不会到20几个循环或者若干后循环后就达到一个阈值了。那第二次PCR的时候，信号不就不准了吗? 疑问2：不用巢式PCR，直接就设计一对引物，然后用taqman探针法来做荧光定量在我的实验中可行吗？   如果可行的话，为啥人家还要用两种方法联合呢。。。另外，或者请高手们指教一下有什么别的好的方法啊，别人在遇到这种同源性基因多的荧光定量的时候一般都是咋干的呀。 新手，大家不吝赐教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help
已经有11人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR
已经有12人回复
- 荧光定量PCR-绝对定量
已经有4人回复
- 荧光定量PCR扩增效率低
已经有16人回复
- 荧光定量PCR结果如何处理
已经有12人回复
- 请教PCR高手，使用SYBR Green I法进行荧光定量PCR对于产物大小有什么要求？
已经有21人回复
- 有做过荧光定量PCR的吗？
已经有9人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线的分析
已经有7人回复
- 荧光定量PCR的模板浓度
已经有12人回复
- 荧光定量PCR的扩增曲线很奇怪，什么原因
已经有7人回复
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
已经有6人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】请教下巢式PCR与二次PCR的区别
已经有12人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导
已经有5人回复
- 【分享】荧光定量PCR简介
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于荧光定量PCR中cdna合成的问题
已经有12人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr
已经有11人回复
2楼2013-05-15 02:04:21
muchong5577
金虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 929.2
- 散金: 67
- 红花: 3
- 帖子: 675
- 在线: 136.6小时
- 虫号: 703384
- 注册: 2009-02-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2013-05-15 11:23:47
4楼2013-05-15 11:51:32
5楼2013-05-27 10:36:41
100