24小时热门版块排行榜    

查看: 3976  |  回复: 15

1151529259

木虫 (小有名气)

[求助] 质粒的双酶切位点切不开是为什么?怎么办呢?切不开载体质粒不能实现重组。。 已有6人参与

质粒的双酶切位点切不开是为什么?怎么办呢?切不开载体质粒不能实现重组。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
切不开的原因太多了~你用的是哪个公司的内切酶?酶切时间是否合适
2楼2014-09-05 17:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1151529259

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-09-05 17:36:52
切不开的原因太多了~你用的是哪个公司的内切酶?酶切时间是否合适

Takara 公司的内切酶,酶切了3h
3楼2014-09-05 20:43:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题的陈述太简单了,你要简单的说一下你的质粒,实验的protocol,这样我们才能帮你发现问题

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-09-07 23:06:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Virove

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一种可能是两个酶切位点可能距离太近,不足以容纳两种内切酶之间的物理距离;还有一种可能是你选择酶切的位点是甲基化的位点,内切酶无法发挥作用。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-09-08 01:29:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1151529259 at 2014-09-05 20:43:08
Takara 公司的内切酶,酶切了3h...

takara的酶要选合适的buffer,用的是哪两种酶,一个都没切开吗
6楼2014-09-08 09:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apollo5206

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你要说下是哪两种酶?酶切时间和buffer我们才能帮你看看问题在哪

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-09-08 09:33:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

去哪里看海

铁虫 (小有名气)

双酶切不应该4个小时吗??多切一会也没事的
8楼2014-09-09 10:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
9楼2014-09-09 12:59:08
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

1151529259

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ncuduhan at 2014-09-07 23:06:38
问题的陈述太简单了,你要简单的说一下你的质粒,实验的protocol,这样我们才能帮你发现问题

质粒PET37b,酶切位点 NdeⅠ 和XhoⅠ...
10楼2014-09-12 14:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1151529259 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 7/350 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 12/600 2026-08-02 20:21 by drbart
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 9/450 2026-08-02 20:18 by 3VGOm6paSgqv
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 6/300 2026-08-02 20:14 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 10/500 2026-08-02 20:12 by 3VGOm6paSgqv
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 11/550 2026-08-02 20:11 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +11 archvillain 2026-08-02 13/650 2026-08-02 20:09 by symmetry
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 10/500 2026-08-02 20:03 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 17/850 2026-08-02 20:03 by 3VGOm6paSgqv
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 4/200 2026-08-02 18:41 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 20/1000 2026-08-02 18:04 by ca3DVAx4OB19
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 15/750 2026-08-02 16:23 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +18 低垂的野花 2026-07-31 24/1200 2026-08-02 16:03 by swallowwh
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 21/1050 2026-08-02 10:56 by iaeyuan
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 10/500 2026-08-02 10:00 by 锦衣卫寒战
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[基金申请] 同事接到电话了,我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
信息提示
请填处理意见