24小时热门版块排行榜    

查看: 3627  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

[求助] 双酶切之后怎么知道切开了呢? 已有4人参与

pET-28a(+),酶切位点为 Nde I 和 Not I 。两个位点之间只有70bp。

双酶切之后我怎么知道切开了呢?

跑电泳的时候70bp早就跑出去了。

用单酶切做对照,也不行。

有什么办法吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

诸事顺遂
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

穆忆枫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:10:31
告诉你,双酶切如果中间只有70bp那你就别想看到两条带,你双酶切时间久点,跟原质粒对照,只要两个酶在通用buffer中活性很高的话,会切开,你在连接片段,应该会成功,如果切太大量的话,一是浪费,二是也不一定可以看到小条带。建议,双酶切时间久点,在后面你构建质粒后还有测序保证呢。
5楼2014-05-23 13:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

测序!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-05-22 18:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:10:19
有两个酶切位点,如果都切成功,正常应该是两天带,因为质粒是环状的;如果单酶切,那就得看你质粒的长度和酶切位点咯,但是只是一条带

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
3楼2014-05-22 18:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你电泳的时候干嘛非得跑完呢? 2000MARKER 点一点  然后跑上五六分钟 看看有没有没有 不就行了? 然后接着跑  看看剩下的啊
借口很贱,,,
4楼2014-05-22 21:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +19 koalala 2026-08-24 21/1050 2026-08-24 16:48 by Wei_ren
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +4 scalable 2026-08-24 4/200 2026-08-24 16:22 by truewz
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 18/900 2026-08-24 12:03 by iaeyuan
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见