应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切之后怎么知道切开了呢？
51/1返回列表
查看: 3306  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

[求助] 双酶切之后怎么知道切开了呢？ 已有4人参与

pET-28a(+)，酶切位点为 Nde I 和 Not I 。两个位点之间只有70bp。

双酶切之后我怎么知道切开了呢？

跑电泳的时候70bp早就跑出去了。

用单酶切做对照，也不行。

有什么办法吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
诸事顺遂
1楼 2014-05-22 18:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:10:19
有两个酶切位点，如果都切成功，正常应该是两天带，因为质粒是环状的；如果单酶切，那就得看你质粒的长度和酶切位点咯，但是只是一条带

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
青山不断，绿水长流
3楼2014-05-22 18:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
测序！

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
2楼2014-05-22 18:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你电泳的时候干嘛非得跑完呢？ 2000MARKER 点一点  然后跑上五六分钟 看看有没有没有 不就行了？ 然后接着跑  看看剩下的啊
赞一下 回复此楼
借口很贱，，，
4楼2014-05-22 21:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

穆忆枫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:10:31
告诉你，双酶切如果中间只有70bp那你就别想看到两条带，你双酶切时间久点，跟原质粒对照，只要两个酶在通用buffer中活性很高的话，会切开，你在连接片段，应该会成功，如果切太大量的话，一是浪费，二是也不一定可以看到小条带。建议，双酶切时间久点，在后面你构建质粒后还有测序保证呢。
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-23 13:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭