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全长PCR扩增的非特异性条带去不掉咋办
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a406331686
银虫
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(幼儿园)
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帖子: 58
在线: 87.4小时
虫号: 3004413
注册: 2014-02-28
性别: GG
专业: 林木遗传育种学
[
求助
]
全长PCR扩增的非特异性条带去不掉咋办
已有3人参与
上下引物的TM值分别为43.6和48.2,我用的是44度每个循环降0.5度,一共降12个循环,然后再用38度,跑20个循环,可是电泳后发现目的条带(1000bp处)有,但是没有750bp处的非特异性条带清楚,而且升高退火温度也没作用,求大神指点····
CAD4_副本.jpg
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1楼
2014-03-25 08:30:29
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liuderong
铁杆木虫
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注册: 2012-07-07
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流!
2014-03-25 13:29:47
把体系做大一点,然后切胶回收大小对的那个片段,之后送测序,对的话就可以了,不用管引物好不好。要是测序不对再考虑引物。
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4楼
2014-03-25 12:09:00
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