应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 扩增条带大小不对
111/2返回列表12下一页
查看: 7212  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蚊在江湖

银虫 (小有名气)

[求助] PCR 扩增条带大小不对 已有6人参与

做半定量PCR
GAPDH内参，内参扩增没有问题

但是靶基因目的条带大小是100多bp，扩增出来的条带都小于100，但是又不像引物二聚体，最下面是引物二聚体的话，那上面一条是什么呢
PCR 扩增条带大小不对
HL RV 2-4   2013-12-18 18hr 19min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-19 15:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蚊在江湖: 金币+5, ★★★很有帮助, 我准备重新设计长一点的目的条带的引物 2013-12-20 10:20:29
我觉得那就是目的条带, 不要相信marker
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-20 02:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-19 15:48:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蚊在江湖

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by achonghello at 2013-12-19 15:48:58
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。

其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-19 17:10:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tarring2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-01-29 16:25:36
下面的条带很像引物二聚体，建议可以再重新设计一对引物试试；另外，这个基因有异构体吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-20 10:18:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenhaiwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不确定就去测个序，看看是什么东西。marker有时也不是很准的
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-20 11:37:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-20 12:28:27
有时候产物的大小和marker指示的大小有一定出入时很正常的，从图来看，应该不是二聚体的条带，所以就只有两种可能，要么是，要么不是，将产物测个序就可以了。
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
7楼2013-12-20 11:53:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hoajie

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能你的Tm低了，扩增出非特异条带了。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-20 12:21:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang宇微

金虫 (正式写手)
换引物换模板重新

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-12-20 12:37:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achonghello

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蚊在江湖 at 2013-12-19 17:10:38
其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已...

晕死，我们平时做的PCR都是用cDNA做模板啊。。。。
有非特异条带应该提高退火温度。。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-12-20 14:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蚊在江湖 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭