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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 扩增条带大小不对
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蚊在江湖

银虫 (小有名气)

[求助] PCR 扩增条带大小不对已有6人参与

做半定量PCR
GAPDH内参，内参扩增没有问题

但是靶基因目的条带大小是100多bp，扩增出来的条带都小于100，但是又不像引物二聚体，最下面是引物二聚体的话，那上面一条是什么呢
PCR 扩增条带大小不对
HL RV 2-4   2013-12-18 18hr 19min.jpg
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1楼2013-12-19 15:21:21
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achonghello

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蚊在江湖 at 2013-12-19 17:10:38
其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已...

晕死，我们平时做的PCR都是用cDNA做模板啊。。。。
有非特异条带应该提高退火温度。。。
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10楼2013-12-20 14:18:23
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achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。
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2楼2013-12-19 15:48:58
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蚊在江湖

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by achonghello at 2013-12-19 15:48:58
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。

其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-19 17:10:38
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蚊在江湖: 金币+5, ★★★很有帮助, 我准备重新设计长一点的目的条带的引物 2013-12-20 10:20:29
我觉得那就是目的条带, 不要相信marker
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-20 02:20:30
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