24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7295  |  回复: 10

蚊在江湖

银虫 (小有名气)

[求助] PCR 扩增条带大小不对 已有6人参与

做半定量PCR
GAPDH内参,内参扩增没有问题

但是靶基因目的条带大小是100多bp,扩增出来的条带都小于100,但是又不像引物二聚体,最下面是引物二聚体的话,那上面一条是什么呢
PCR 扩增条带大小不对
HL RV 2-4   2013-12-18 18hr 19min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
蚊在江湖: 金币+5, ★★★很有帮助, 我准备重新设计长一点的目的条带的引物 2013-12-20 10:20:29
我觉得那就是目的条带, 不要相信marker
4楼2013-12-20 02:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。
2楼2013-12-19 15:48:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蚊在江湖

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by achonghello at 2013-12-19 15:48:58
不好意思没做过半定量的
扩增条件还需要继续摸索吧。。。。

其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已
3楼2013-12-19 17:10:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tarring2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:25:36
下面的条带很像引物二聚体,建议可以再重新设计一对引物试试;另外,这个基因有异构体吗?
5楼2013-12-20 10:18:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenhaiwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不确定就去测个序,看看是什么东西。marker有时也不是很准的
6楼2013-12-20 11:37:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-20 12:28:27
有时候产物的大小和marker指示的大小有一定出入时很正常的,从图来看,应该不是二聚体的条带,所以就只有两种可能,要么是,要么不是,将产物测个序就可以了。
生物化学与分子生物学
7楼2013-12-20 11:53:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hoajie

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能你的Tm低了,扩增出非特异条带了。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2013-12-20 12:21:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang宇微

金虫 (正式写手)

换引物换模板重新

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2013-12-20 12:37:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蚊在江湖 at 2013-12-19 17:10:38
其实和普通PCR一样
只不过是用cDNA为模板而已...

晕死,我们平时做的PCR都是用cDNA做模板啊。。。。
有非特异条带应该提高退火温度。。。
10楼2013-12-20 14:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蚊在江湖 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +26 Faune 2026-04-06 26/1300 2026-04-12 10:24 by lhj2009
[考研] 一志愿安大生物学07初试322、本科二本、调剂求助 +5 李多米lee. 2026-04-12 6/300 2026-04-12 09:59 by 雪山飞狐7233
[考研] 调剂 +10 月@163.com 2026-04-11 10/500 2026-04-12 09:14 by zhouyuwinner
[考研] 0854调剂 +8 长弓傲 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:44 by 蓝云思雨
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +24 招61排名62 2026-04-07 28/1400 2026-04-10 16:15 by yx54321
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[考研] 材料299专硕求调剂 +10 +21 2026-04-09 10/500 2026-04-09 17:34 by 1753564080
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 304求调剂 +16 c297914 2026-04-05 17/850 2026-04-08 13:00 by grayjzr
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 14/700 2026-04-07 17:52 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 312求调剂 +4 LR6 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:42 by jp9609
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
信息提示
请填处理意见