应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物胶回收试剂盒
51/1返回列表
查看: 2009  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

[求助] PCR产物胶回收试剂盒 已有1人参与

最近在克隆片段，5K左右，PCR上样20微，条带挺亮的了
回收后，加A，用于下一步和T载体连接，
加A之后跑了下电泳，上样量5微，结果效果就成这么暗了，用的是上海捷瑞的胶回收试剂盒，
搞了11个片段，第三遍了~，前两次都回收不到，试剂盒换的是新的一套，结果还是这么惨，
求各位大神帮分析下，或者提供下自己用的比较好的试剂盒（最小片段2.6K，3个3.5K，剩余基本都是5K左右）

PCR产物胶回收试剂盒
PCR产物.jpg


PCR产物胶回收试剂盒-1
加A后回收.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-16 21:53:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dllchina at 2014-03-17 19:25:20
是这个温度，酶还是用的新的...

那你回收之后带亮不亮？   加A之后可以不回收，直接做转化。
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-17 20:12:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-17 10:25:58
dllchina: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-03-17 19:26:03
的确很低，浓度你再测一下，看看连载体是否达到要求。我们实验室用的试剂盒是天根产的效果还可以。
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-03-17 07:53:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
最近在克隆片段，5K左右，PCR上样20微，条带挺亮的了
回收后，可以估量。
加A之后不用回收，直接估量就行，然后连接。
加A用Taq酶是72度反应30min，你看看温度你设置的对不对？
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-17 17:01:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-17 17:01:40
最近在克隆片段，5K左右，PCR上样20微，条带挺亮的了
回收后，可以估量。
加A之后不用回收，直接估量就行，然后连接。
加A用Taq酶是72度反应30min，你看看温度你设置的对不对？

是这个温度，酶还是用的新的
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-17 19:25:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭