24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 11613  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

coolcdh

铁虫 (初入文坛)

[求助] pcr目的条带出现杂带,是什么原因? 已有6人参与

红线上条带应该是目的条带(目的基因引物是生工免费合成的)出现的位置(从左到右梯度50,52,54,55,56,58),但是目的基因杂带太多了。为了说明操作没有问题,图中红箭和圆圈头分别是我们课题组前期已经证实好用的另一基因和GAPDH内参,另一基因和内参出现的位置正确。Marker是1000bp,产物大小是362bp。
一,        操作应该没有问题,不然另一基因和内参也不会ok,
二,        是不是目的基因引物的问题呢?我的pcr条件是:预变性94度5min,(变性94度30s、退火梯度50,52,54,55,56,58,时间30s、延伸72度30s,35cycles),延伸72度10min
pcr目的条带出现杂带,是什么原因?
aa.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

沙漏 PCR相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以上NCBI 用primer blast 看一下,是不是引物特异性不好?
5楼2014-01-19 23:04:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

yyshpy007

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-01-19 19:34:13
本帖内容被屏蔽

2楼2014-01-19 00:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半生一梦

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-01-19 19:34:20
应该是引物特异性不够高啊 要不重新选一对引物
要不切胶回收连载体再转化感受态呗 就是稍麻烦
3楼2014-01-19 15:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看样子应该是引物的特异性不够高吧  如果是做克隆的话  回收一下就行了吧
4楼2014-01-19 21:21:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +4 好好读书。 2026-04-01 4/200 2026-04-05 16:39 by arrow8852
[考研] 化学357分,考研调剂 +10 .Starry. 2026-04-04 11/550 2026-04-05 10:57 by cql1109
[考研] 求调剂 +3 电气小神童 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:17 by barlinike
[考研] 找调剂 +7 楚乔乔 2026-04-01 7/350 2026-04-05 09:07 by dick_runner
[考研] 292分,材料与化工,申请调剂 +22 程晴之 2026-04-01 26/1300 2026-04-04 22:03 by hemengdong
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 材料专业383求调剂 +8 郭阳阳阳成 2026-04-03 8/400 2026-04-04 10:29 by Rednal.
[考研] 化学调剂求助 +6 LULONG1 2026-04-03 6/300 2026-04-03 23:13 by qzxyhcsy
[考研] 总分328生物与医药考数学求调剂 +7 aaadim 2026-04-02 9/450 2026-04-03 22:53 by syh9288
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 抱歉 +5 田洪有 2026-03-30 5/250 2026-04-03 10:24 by linyelide
[考研] 324求调剂 +5 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:16 by sanrepian
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 江苏苏北高校诚邀调剂同学 +3 zzll406 2026-03-31 3/150 2026-03-31 16:54 by 及时行乐fan
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135,现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
信息提示
请填处理意见