24小时热门版块排行榜    

查看: 1931  |  回复: 6

殷筱婕

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果为目的条带,可是测序同源比对很差,这是为什么呀? 求助!!!

我拿山羊NCBI上登录的序列来设计引物,PCR后连接载体,菌液测序,结果再与原序列比对,同源性很差,表现为断断续续的。怀疑测的是载体的那一段,于是又直接测PCR产物,结果一样。为什么扩出来的片段没问题,测序是这种结果?请问是什么原因呢?有没什么可以解决的办法呢?谢谢,请各位大神帮帮忙!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
比对一下氨基酸看看

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-07-19 22:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
殷筱婕(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-20 10:45:25
你换个测序公司 试试看呢,如果还是这样,那就可能是你扩增的不对或者序列本身就不对
3楼2013-07-19 22:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雅娣

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-31 22:42:03
我遇到过这样的情况,PCR条带很亮说明某个长度的DNA被扩出来了,但是比对的结果不好就说明提出来的DNA不是目的DNA,是其他东西。。也有可能是引物的问题,扩出来的不是目的基因。。
4楼2013-07-31 22:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxf427427

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

把引物拿去ncbi blast  看是否和其他片段也能结合 刚好扩出来同样大小片段
5楼2013-09-29 09:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你应该在PCR之后就对PCR产物进行测序,如果是你的目的片段,你再做连接,如果不是你的目的序列,你要检查一下是不是引物特异性差还是说你的山羊品种和数据库中的不一样,你可以把你的引物在NCBI的Primer-BLAST 上balst一下,看看能不能扩增出你的目的片段
用心
6楼2013-10-16 15:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xfyangsibs

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

说明你扩增到的就不是目的条带啊,大小什么的不说明问题,测序一般不会出错,建议换引物。
7楼2013-10-17 09:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 殷筱婕 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 326求调剂 +3 上岸的小葡 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:50 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,药学 +3 归零lbm 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:21 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 328,0703考生求调剂,一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 306求调剂 +4 唐薏薏 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:19 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 求调剂(材料与化工327) +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +4 ly3471z 2026-03-13 4/200 2026-03-13 13:00 by JourneyLucky
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
信息提示
请填处理意见