应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR结果为目的条带，可是测序同源比对很差，这是为什么呀？ 求助！！！
51/1返回列表
查看: 2525  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

殷筱婕

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果为目的条带，可是测序同源比对很差，这是为什么呀？ 求助！！！

我拿山羊NCBI上登录的序列来设计引物，PCR后连接载体，菌液测序，结果再与原序列比对，同源性很差，表现为断断续续的。怀疑测的是载体的那一段，于是又直接测PCR产物，结果一样。为什么扩出来的片段没问题，测序是这种结果？请问是什么原因呢？有没什么可以解决的办法呢？谢谢，请各位大神帮帮忙！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-19 21:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你应该在PCR之后就对PCR产物进行测序，如果是你的目的片段，你再做连接，如果不是你的目的序列，你要检查一下是不是引物特异性差还是说你的山羊品种和数据库中的不一样，你可以把你的引物在NCBI的Primer-BLAST 上balst一下，看看能不能扩增出你的目的片段
赞一下(1人) 回复此楼
用心
6楼2013-10-16 15:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
比对一下氨基酸看看

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-19 22:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
殷筱婕(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-20 10:45:25
你换个测序公司 试试看呢，如果还是这样，那就可能是你扩增的不对或者序列本身就不对
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-19 22:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雅娣

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-31 22:42:03
我遇到过这样的情况，PCR条带很亮说明某个长度的DNA被扩出来了，但是比对的结果不好就说明提出来的DNA不是目的DNA，是其他东西。。也有可能是引物的问题，扩出来的不是目的基因。。
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-31 22:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 3/150 2026-11-11 17:42 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-11 17:20 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:03 by TgvkbZZl9tqB
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 8/400 2026-11-11 16:49 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 7/350 2026-11-11 16:41 by TgvkbZZl9tqB
[基金申请] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 4/200 2026-11-11 15:13 by TgvkbZZl9tqB
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 14:02 by cdqGD6ftHmbl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 13:56 by cdqGD6ftHmbl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 4/200 2026-11-11 12:14 by gRND4NVAZ8VG
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 3/150 2026-11-11 11:38 by gRND4NVAZ8VG
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:32 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:26 by 1Nb0IVlmV6v0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 4/200 2026-11-11 08:34 by 1Nb0IVlmV6v0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 07:06 by Z7qfCsdIiD1T
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭