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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么PCR条带在1500的样子， 测序结果才1057bp
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)

[求助] 为什么PCR条带在1500的样子， 测序结果才1057bp

提取后的基因组DNA，经PCR扩增，得到1%的琼脂糖凝胶电流图，条带大小在1500的样子，但送到测序公司测序结果为1057bp,这是什么原因？
我是新手，实在不知道怎么继续啊，这个结果正确吗？
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不要让我早起！！！
1楼 2012-02-23 21:39:20
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smilerion

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测序引物是你自己设的么，看看引物的位置和比对下峰型你就知道了
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2楼2012-02-24 04:03:45
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

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感谢参与，应助指数 +1
因为一个测序反应最多也就测1000bp左右，你1500的片段最好正反向都测。
请原谅我把你当新新手了……
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3楼2012-02-24 09:52:26
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zhiqiang5070

木虫 (正式写手)

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感谢参与，应助指数 +1
应该双向测通啊，一般只有800bp是准确的
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无善无恶心之体
4楼2012-02-24 10:35:43
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

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感谢参与，应助指数 +1
为了准确，最好还是转入载体，做克隆，测序
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风雪夜归人
5楼2012-02-24 11:31:22
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
觉得应该是测序没有测通，建议测通或者正反向测序
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6楼2012-02-24 15:10:11
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wuxmxjtu

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
7楼2012-02-24 20:28:23
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lillian菲

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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wanhscn(金币+1): 有道理！ 2012-02-25 17:21:00
测序应该是准确的，电泳图只是个大概的数值，不是很准确的，还是以测序结果为准
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8楼2012-02-25 13:59:27
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)
学习啦  谢谢
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快乐奋斗，创造所有。
9楼2012-02-25 16:46:19
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guojianping

木虫 (正式写手)

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1.5KB应该测序是没问题的，但是最好还好测通吧。我个人觉得还是你构建的问题，PCR可能P错位置，引物什么的有问题
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10楼2012-02-25 19:35:53
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