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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么PCR条带在1500的样子， 测序结果才1057bp
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by gongeleven at 2012-02-24 09:52:26:
因为一个测序反应最多也就测1000bp左右，你1500的片段最好正反向都测。
请原谅我把你当新新手了……

的确是很新的新手啊，测序是送出去做的···
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11楼2012-02-27 10:15:15
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by smilerion at 2012-02-24 04:03:45:
测序引物是你自己设的么，看看引物的位置和比对下峰型你就知道了

通用引物
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12楼2012-02-27 10:15:42
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by zhiqiang5070 at 2012-02-24 10:35:43:
应该双向测通啊，一般只有800bp是准确的

我是送出去测的···过程不清楚啊
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13楼2012-02-27 10:16:35
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by wuxmxjtu at 2012-02-24 20:28:23:
一般测序测不了这么长，只要测出来的经过比对没有问题就可以了，没有必要纠结长度问题

但是论文中出现的凝胶电泳图岂不是和测序结果相差挺大
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14楼2012-02-27 10:18:20
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by guojianping at 2012-02-25 19:35:53:
1.5KB应该测序是没问题的，但是最好还好测通吧。我个人觉得还是你构建的问题，PCR可能P错位置，引物什么的有问题

嗯，打算重做一次试试看了
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15楼2012-02-27 10:20:01
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kellysnowtu

铁虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-02-25 13:59:27:
测序应该是准确的，电泳图只是个大概的数值，不是很准确的，还是以测序结果为准

那论文中放入电泳图 ，岂不是两者相差很大
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16楼2012-02-27 10:20:58
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至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一、确定自己测序是否测通，可以邮件回复询问测序公司
第二、测序时，应该送2~3平行样品，这样对测序结果分析就可以确定是样品问题还是测序问题。
第三、确定自己的序列片段长度，有引物，有模板，这个应很好确定。
谢昂能够给你一些帮助。
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总有一天我要修改用户名。
17楼2012-02-27 11:49:19
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