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DEEG条带测序问题
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| 各位高手，本人目前正在做DGGE，使用的是银染进行染色，对DGGE电泳单一条带切割回收后，再扩增测序，但是测序结果有杂峰，说明PCR出来的结果不是单一条带，这就很奇怪，因为模板是DGGE的单一条带。我想请教各位高手，在如何获得单一条带这方面,有什么建议么?难道非得进行克隆转化测质粒么，那对于多条带图谱来说，就太麻烦了吧。 |
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2楼2011-04-21 14:27:52
xiadongliang
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3楼2011-04-21 17:07:26
4楼2011-04-22 09:13:00
xiadongliang
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5楼2011-04-22 10:42:36
hitliutao(金币+2): 2011-04-22 19:41:07
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6楼2011-04-22 11:13:25
按道理来说确实应该克隆测序的，不过你也可以尝试一下这么做：跑完第一次ＤＧＧＥ后，割胶提DNA后，PCR，然后再跑一次ＤＧＧＥ，确定是单一条带的话再进行割胶测序。 7楼2011-04-26 09:51:38
8楼2012-04-21 23:21:38