| 查看: 1815 | 回复: 7 | ||
[求助]
DEEG条带测序问题
|
| 各位高手，本人目前正在做DGGE，使用的是银染进行染色，对DGGE电泳单一条带切割回收后，再扩增测序，但是测序结果有杂峰，说明PCR出来的结果不是单一条带，这就很奇怪，因为模板是DGGE的单一条带。我想请教各位高手，在如何获得单一条带这方面,有什么建议么?难道非得进行克隆转化测质粒么，那对于多条带图谱来说，就太麻烦了吧。 |
回复此楼» 猜你喜欢
085600 英一数二272求调剂
已经有15人回复
-
材料调剂
已经有3人回复
-
高分子化学与物理调剂
已经有15人回复
-
268求调剂
已经有7人回复
-
289求调剂
已经有8人回复
-
理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！
已经有6人回复
-
中国科学技术大学材料与化工281求调剂，有科研和获奖经历
已经有4人回复
-
283求调剂
已经有4人回复
-
275求调剂
已经有6人回复
-
284求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒测序鉴定条带弱无法测序，求指点
已经有9人回复
- 测序的问题
已经有24人回复
- 16S rDNA测序问题
已经有3人回复
- 这样的电泳条带能测序吗？
已经有17人回复
- 【求助/交流】请问DGGE条带测序后如何绘制系统发育图
已经有14人回复
- 【求助/交流】测序问题：PCR产物未纯化测序会怎样？
已经有9人回复
- 【问题反馈】一对引物扩出来的产物测序后竟然是很多质粒的PCR产物，再怎么区分呢？
已经有10人回复
2楼2011-04-21 14:27:52
xiadongliang
金虫 (正式写手)
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 973.3
- 散金: 1299
- 红花: 15
- 帖子: 759
- 在线: 361.7小时
- 虫号: 433819
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
3楼2011-04-21 17:07:26
4楼2011-04-22 09:13:00
xiadongliang
金虫 (正式写手)
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 973.3
- 散金: 1299
- 红花: 15
- 帖子: 759
- 在线: 361.7小时
- 虫号: 433819
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
5楼2011-04-22 10:42:36
hitliutao(金币+2): 2011-04-22 19:41:07
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2011-04-22 11:13:25
按道理来说确实应该克隆测序的，不过你也可以尝试一下这么做：跑完第一次ＤＧＧＥ后，割胶提DNA后，PCR，然后再跑一次ＤＧＧＥ，确定是单一条带的话再进行割胶测序。 7楼2011-04-26 09:51:38
8楼2012-04-21 23:21:38
5