24小时热门版块排行榜    

查看: 1859  |  回复: 3

yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 16S rDNA测序问题

我对需要测序的菌株DNA进行PCR,只发现了一条带才进行大量PCR割胶回收的,但是等转化大肠杆菌DH5a后,挑起它的转化子进行PCR,结果出现了两条带,目的条带是1500bp,同时我也做了阳性对照,也出现了两条一样的条带。
出现这样的结果,我还能不能把我的转化子摇菌送出去测序啊??
要是送出去的话,会不会因为背景太杂,测不出来啊??
还请各位大虾帮帮忙!!
Marker为15000bp,其左边为我挑取的转化子,其右边为阳性对照(直接是DNA进行PCR)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-07 23:25:30
yesucao(金币+5): 我也感觉像是非特异性的扩增,不然就是水出现问题了 2011-06-08 09:20:24
是不是载体上也有你引物的结合部位?如果是非特异性扩增不会影响测序结果的,因为他们是用的通用引物测的,你不妨试一试,反正测序不是太贵。
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
2楼2011-06-07 22:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-06-07 22:53:26:
是不是载体上也有你引物的结合部位?如果是非特异性扩增不会影响测序结果的,因为他们是用的通用引物测的,你不妨试一试,反正测序不是太贵。

载体我用的是pMD19-T,用于16S rRNA测序的
3楼2011-06-08 09:01:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smiled001

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2011-06-08 23:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yesucao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 我面上完蛋了 +5 且听虎啸 2026-08-20 5/250 2026-08-21 09:48 by climap
[基金申请] 让我中一个面上吧! +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见