24小时热门版块排行榜    

查看: 1864  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 16S rDNA测序问题

我对需要测序的菌株DNA进行PCR,只发现了一条带才进行大量PCR割胶回收的,但是等转化大肠杆菌DH5a后,挑起它的转化子进行PCR,结果出现了两条带,目的条带是1500bp,同时我也做了阳性对照,也出现了两条一样的条带。
出现这样的结果,我还能不能把我的转化子摇菌送出去测序啊??
要是送出去的话,会不会因为背景太杂,测不出来啊??
还请各位大虾帮帮忙!!
Marker为15000bp,其左边为我挑取的转化子,其右边为阳性对照(直接是DNA进行PCR)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smiled001

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2011-06-08 23:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-07 23:25:30
yesucao(金币+5): 我也感觉像是非特异性的扩增,不然就是水出现问题了 2011-06-08 09:20:24
是不是载体上也有你引物的结合部位?如果是非特异性扩增不会影响测序结果的,因为他们是用的通用引物测的,你不妨试一试,反正测序不是太贵。
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
2楼2011-06-07 22:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-06-07 22:53:26:
是不是载体上也有你引物的结合部位?如果是非特异性扩增不会影响测序结果的,因为他们是用的通用引物测的,你不妨试一试,反正测序不是太贵。

载体我用的是pMD19-T,用于16S rRNA测序的
3楼2011-06-08 09:01:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 18/900 2026-08-21 11:53 by wuchongjun
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见