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muzi86

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr跑的目的条带时有时无怎么回事啊?

我做rt-pcr检测植物病毒,现在rna提出来了,cDNA也反转录了,就是检测pcr产物,条带时有时无,无法做后续克隆,麻烦高人指点下啦
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hylee103

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能某个试剂不好用了,或者引物加错了。
2楼2013-01-09 14:59:51
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070901110197

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是你的引物降解了,重新合成引物,稀释后的引物不建议放在4°
3楼2013-01-09 16:37:04
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muzi86

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 070901110197 at 2013-01-09 16:37:04
可能是你的引物降解了,重新合成引物,稀释后的引物不建议放在4°

引物在4°冰箱里放了一周,但是这一周几乎都在用的
4楼2013-01-09 20:47:06
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hubohuna

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是同一管rt产物?还有就是你跑了多少个循环,条带亮度如何?
5楼2013-01-09 22:37:42
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muzi86

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hubohuna at 2013-01-09 22:37:42
是同一管rt产物?还有就是你跑了多少个循环,条带亮度如何?

条带不是很亮,三条带均不亮,该不会是引物特异性不强吧,rt产物没变。
6楼2013-01-10 13:48:58
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