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大神救命！！！菌液PCR 出来酶切质粒没有目的条带 已有1人参与
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如题，我挑单菌落加10ul水稀释后，取6ul当模板，PCR检出目的条带，但是把剩下的4ul 划线，摇菌后提质粒酶切没有切到目的片段，反反复复做了两个多月了，眼看就快毕不了业了，求大神支招啊！！！ 图1：  图2：http://img01.taobaocdn.com/imgextra/i1/398212692/T2h21uXydaXXXXXXXX_!!398212692.jpg 图3：http://img04.taobaocdn.com/imgextra/i4/398212692/T2uNKCXzxXXXXXXXXX_!!398212692.jpg T载体2700bp左右，目的片段：1300左右 各个图首道为MAKER(200bp ladder，最亮的为1000bp，最大的为4000) 第一个图的第二道是目的片段，后面四个为双酶切。第二个图为菌液PCR，前面4个中2,3；后面5个种1，4为目的片段（maker道除外），最后一道为含目的片段的质粒。用该4个出来目的片段的菌液摇菌后提质粒双酶切，最后一个图前面5个是另外挑的一批单克隆菌液PCR（maker 道除外），然后中间比较淡的4个为上一图的质粒双酶切，接下四个为分别单酶切，最后两个为不作处理的质粒。， |
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3楼2013-12-17 19:28:01
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
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专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
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2楼2013-12-16 21:53:52
hitslu
银虫 (初入文坛)
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- 帖子: 17
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- 虫号: 2877321
- 注册: 2013-12-17
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
只有一段弥散状，郁闷死了，估计只能送去测序了 4楼2013-12-19 10:26:00
5楼2013-12-19 21:20:55
