应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决
51/1返回列表
查看: 6010  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

2012continue

新虫 (小有名气)

[交流] 定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决 已有2人参与

定量PCR：
问题1：内参240bp，基因140bp，有必要再重新设计内参引物吗？
       2：目的基因与内参的Ct值差异大。内参17-25，目的基因28-35。需要调整模板浓度吗？可不可以把内参模板稀释，而目的基因模板不稀释。
       3：扩增效率。内参标准曲线好做，240bp扩增效率接近100%。但是目的基因的扩增效率不好做，表达量比较低，表达量最高的组织Ct都有28,，标准曲线做得好不好跟起始浓度应该有关系吧。
谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-06 09:53:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2883508

新虫 (初入文坛)
内参和目的基因的Ct值不用保持一致的，只要扩增效率好就行，有些基因表达量低，你的增加模板的浓度，或者换染料，SYBR染料做基因的表达，只能做到拷贝数大于5000的基因，小于这个拷贝数的基因没法检测到，Taqman探针的检测效率要高一些，就是要贵，也麻烦一些
赞一下 回复此楼
人生就是要不断的前进，忘掉不好的，记住好的向前行
3楼2013-11-12 11:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

394929934

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
俺也好奇。同样求解，顶起
赞一下 回复此楼
动物营养交流群181980105
2楼2013-11-11 21:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭