24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 6058  |  回复: 2

2012continue

新虫 (小有名气)

[交流] 定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决 已有2人参与

定量PCR:
问题1:内参240bp,基因140bp,有必要再重新设计内参引物吗?
       2:目的基因与内参的Ct值差异大。内参17-25,目的基因28-35。需要调整模板浓度吗?可不可以把内参模板稀释,而目的基因模板不稀释。
       3:扩增效率。内参标准曲线好做,240bp扩增效率接近100%。但是目的基因的扩增效率不好做,表达量比较低,表达量最高的组织Ct都有28,,标准曲线做得好不好跟起始浓度应该有关系吧。
谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

394929934

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
俺也好奇。同样求解,顶起
动物营养交流群181980105
2楼2013-11-11 21:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2883508

新虫 (初入文坛)

内参和目的基因的Ct值不用保持一致的,只要扩增效率好就行,有些基因表达量低,你的增加模板的浓度,或者换染料,SYBR染料做基因的表达,只能做到拷贝数大于5000的基因,小于这个拷贝数的基因没法检测到,Taqman探针的检测效率要高一些,就是要贵,也麻烦一些
人生就是要不断的前进,忘掉不好的,记住好的向前行
3楼2013-11-12 11:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2012continue 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 总分293求调剂 +7 加一一九 2026-03-25 10/500 2026-03-29 16:53 by 杨杨杨紫
[考研] 调剂310 +11 温柔的晚安 2026-03-25 12/600 2026-03-29 16:51 by 杨杨杨紫
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +6 minht 2026-03-29 6/300 2026-03-29 16:21 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +7 cccchenso 2026-03-29 7/350 2026-03-29 15:00 by 唐沐儿
[考研] 340求调剂 +6 Amber00 2026-03-26 6/300 2026-03-29 12:06 by 无际的草原
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
请填处理意见