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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决
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新虫 (小有名气)

[交流] 定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决 已有2人参与

定量PCR：
问题1：内参240bp，基因140bp，有必要再重新设计内参引物吗？
       2：目的基因与内参的Ct值差异大。内参17-25，目的基因28-35。需要调整模板浓度吗？可不可以把内参模板稀释，而目的基因模板不稀释。
       3：扩增效率。内参标准曲线好做，240bp扩增效率接近100%。但是目的基因的扩增效率不好做，表达量比较低，表达量最高的组织Ct都有28,，标准曲线做得好不好跟起始浓度应该有关系吧。
谢谢！
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1楼 2013-11-06 09:53:49
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