| 查看: 1585 | 回复: 13 | ||||
jonew木虫 (正式写手)
|
[求助]
PCR结果分析
|
|||
各路，请问哪些亮亮的拖带是怎么回事？我下一步该怎么改进？我的目的条带在2500bp ，模板是cDNA。急急急！！！！ 望各路大侠指点。。。 2013.9.26.pcr-2.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
-
两个氟原子与一段氨基甲酸甲酯：BLU-5937 的母液配制与稳定性边界
已经有0人回复
-
司美那非（TPN171）：从嘧啶酮母核到工艺放大的结构、色谱与质控参数解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助解读PCR图为什么会这么烂
已经有13人回复
- 求助PCR结果分析~~~
已经有8人回复
- 请大神帮我看看我的实时定量PCR结果 分析一下失败的原因 有图有真相
已经有3人回复
- pcr测序结果分析
已经有15人回复
- 相对荧光定量PCR
已经有11人回复
- cDNA凝胶电泳结果分析
已经有14人回复
- qPCR结果分析，相对定量
已经有3人回复
- 求助microRNA real time pcr结果分析
已经有4人回复
- RT-PCR结果分析求助
已经有5人回复
- PCR测序结果分析
已经有8人回复
- 荧光定量PCR结果如何处理
已经有12人回复
- Q-PCR和RT-PCR结果不一致呢？
已经有3人回复
- 定量PCR的熔解曲线分析和PCRmix的选择
已经有6人回复
- 相对定量荧光PCR结果分析中的SD如何计算？
已经有7人回复
- rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。
已经有20人回复
- 不解的问题，q-PCR结果分析。
已经有6人回复
- 求帮忙分析下菌液PCR检测结果
已经有19人回复
- ELISA的结果分析及相关软件
已经有11人回复
- 实时定量PCR 数据处理
已经有7人回复
- 荧光定量PCR(相对定量)的分析结果2-△△Ct怎么看呀?
已经有31人回复
- 【求助/交流】RT-PCR的数据处理
已经有14人回复
zr281069
银虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 366.7
- 帖子: 74
- 在线: 265.8小时
- 虫号: 2027843
- 注册: 2012-09-25
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
3楼2013-09-27 17:23:16
7楼2013-09-30 08:14:19
10楼2013-10-01 15:16:32
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24339.7
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
2楼2013-09-27 17:09:49
4楼2013-09-29 14:43:23
5楼2013-09-29 14:44:46
jonew
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 4834.2
- 散金: 74
- 红花: 3
- 帖子: 648
- 在线: 163.6小时
- 虫号: 1983651
- 注册: 2012-09-07
- 性别: GG
- 专业: 拓扑学
6楼2013-09-29 18:18:21
8楼2013-09-30 17:17:07
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
jonew: 金币+4 2013-10-02 15:46:13
jonew: 金币+4 2013-10-02 15:46:13
|
拖尾条带是非特异性扩增的产物 推荐解决措施： 重新设计退火温度相对较低一些的引物 采用热启动的Taq酶，一些国产商业化的热启动酶也都不贵的，便宜好用（国产的比如Transgen的普通热启动酶250单位也才￥180，跟Takara、Thermo比起来价钱简直弱爆了。） 采用梯度退火温度PCR，退火温度从现在的退火温度开始依次提高，每次一度，直到65度左右（注意，我指的不是touch down） 缩短退火时间 降低镁离子、减少Taq酶的量（这个说实话真没觉得有啥必要了） 以这个产物为模板再进行PCR的话也可以一试，但是按照我们的经验基本不会有结果的 |
9楼2013-09-30 23:26:22
