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[交流]
定量PCR的熔解曲线分析和PCRmix的选择
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各位定量PCR的虫侠们: 小虫第一次做定量PCR,关于熔解曲线的分析程序问题很大!我用的是ABI 7900HT仪器,做相对定量的时候,熔解曲线分析程序不能直接加在反应程序后面。程序跑完后,手动开始熔解曲线的分析,用的是仪器自带的默认程序,95度15s,60度15s,95度15s,40个循环。然而此时,问题出现了,仪器自动分析该程序跑完需要7.5小时,我等了3个循环,约用了50分钟。 请做过定量PCR 的虫侠们帮我分析一下,问题到底出在哪里? --------------------------------我是第一和第二问题的分割线----------------------------------- 另外一个问题,有不带UDG酶的Fast Sybr Green Master Mix的产品么(无论哪家公司)?或者使用带有UDG酶的qPCRmix,而在反应开始之前不设置50度的UDG酶反应,应该不会对反应有太大影响吧? [ Last edited by xiao7270 on 2012-7-4 at 13:30 ] |
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xiao7270: 金币+1, 文坛精英也来蹭金币,满足一下该至尊吧 2012-07-05 11:03:07
祝福祝福







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祝实验成功
xiao7270